细胞培养箱通常配备有加热和制冷系统。加热系统能够将箱内温度升高并维持在一个适宜细胞生长的范围内,一般恒定在37°C左右;而制冷系统则可在需要时降低温度或辅助调节,确保温度的稳定性。培养箱还采用六面直热系统,使加热均匀迅速,温度恢复快,且温度均匀性高、波动度小。
为了防止培养液蒸发,保持细胞所处的湿润环境,培养箱会通过特定的装置来维持较高的湿度水平,大约为95。横向双循环风道设计有助于保证温湿度的均一性。对于二氧化碳培养箱而言,它能准确地调控箱体内的CO浓度。这是因为合适的CO浓度可以维持细胞培养液的pH值稳定在7.2–7.4之间,这是细胞正常生长所需的条件之一。同时,配合进口传感器实现自动补偿,进一步提高了控制的精度。
细胞培养箱的使用步骤:
1.准备工作
-清洁与消毒:在使用前,需对培养箱内部及放置样品的区域进行清洁和消毒,以防止微生物污染影响细胞培养效果。可以使用75酒精擦拭内壁、搁板等部位。
-检查设备状态:查看培养箱的各项指示灯是否正常亮起,确认电源连接稳定且无故障提示。同时,检查门封条是否完好,确保密封性良好,避免外界空气过度进入干扰箱内环境。
2.参数设置
-温度设定:依据所培养细胞的类型和实验要求,在温控面板上准确地设置合适的温度值。不同类型的细胞有不同的生长温度范围,如哺乳动物细胞通常在37℃左右。
-湿度调节:按照实验需求调整湿度水平。一般来说,大多数细胞培养需要相对较高的湿度环境,以保持培养基的水分平衡,防止干燥对细胞造成损害。通过加水或排水等方式来实现目标湿度。
-CO2浓度控制:对于需要特定二氧化碳水平的细胞培养体系,准确设置CO2浓度。CO2不仅影响着培养液的pH值,还参与细胞的一些生理过程。可通过内置的CO2传感器和控制系统来进行准确调控。
3.预平衡验证:参数设置完成后,不要立即放入样品,应让培养箱先运行一段时间,使箱内的实际温度、湿度和CO2浓度达到并稳定在设定值附近。这一过程称为预平衡,一般需要数小时甚至更长时间,具体取决于设备的性能和环境条件。期间可使用专业的监测仪器定期检测箱内的参数变化,直至确认各项指标均已稳定且符合要求。
4.放入样品:当培养箱内的环境参数稳定后,将处理好的细胞样本小心地放入培养箱内的合适位置。注意不要过于密集地摆放样品,以保证空气流通均匀,每个样品都能充分接触到适宜的培养条件。如果是多层搁板的培养箱,尽量平均分配样品到各层。
5.实时监测与记录:在细胞培养过程中,持续关注培养箱的工作状态和参数变化。许多现代培养箱配备了数据记录功能,可以自动保存历史数据;也可以手动定时记录关键参数,以便后续分析和追溯。若发现异常情况,如温度波动过大、湿度偏离设定范围等,应及时采取措施进行调整或排查原因。